丹参治疗前后口腔黏膜下纤维性变超微结构的研究

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临床口腔医学杂志 2008 年 12 月第 24 卷第 12 期 J Clin Stomatol,Dec,2008,Vol.24.No.12 口腔黏膜下纤维性变（oral submucous fibrosis，OS F）是一种慢性隐匿性、具有癌变倾向的炎性疾病［1］。目前 OSF 的治疗十分棘手，皮质激素因副作用大而不宜长期使用，手术切除条索疤痕存在术后疤痕挛缩的并发症。因此寻找副作用小，安全有效的方法已成为 OSF 治疗学研究的热点，我科用丹参治疗 OSF 并取得了较好的疗效，本研究通过观察丹参治疗前后内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞超微结构的变化进一步验证丹参对 OSF 的临床治疗作用。材料和方法 1 材料　根据患者的知情同意，按 Pindborg 病理学标准及临床表现［2］，10 例 OSF 患者均选自中南大学湘雅医院口腔科黏膜病专科门诊 2006～2007 年间就诊的自愿者病例，男 9 例，女 1 例，平均年龄 30.5 岁，病程 6 个月～10 年。所有标本均取口腔颊黏膜组织，实验病例治疗后标本取自治疗前取标本部位相隔 5 mm 处，平均分为 2 份，1 份用 10%甲醛固定，常规石蜡包埋，切片作 HE 染色以核实病理诊断，另 1 份固定于 2.5%戊二醛固定液中，拟作透射电镜观察。 2 方法　采用包埋前染色方法。新鲜的口腔黏膜切成 5 mm×5 mm×1 mm 大小，固定于 2.5%戊二醛液中 8 h～1 周。步骤如下：①病理组织制成 15～30 μm 厚的切片，0.1 ml 的 PBS 液中漂洗，1%的锇酸固定，再次 0.1 ml 的 PBS 液漂洗；②梯度丙酮溶液脱水；③Epon812 包埋剂与 100%丙酮 1：1 比例浸泡、包埋； ④光镜下 LKB 修块机修块定位；⑤LKB 超薄切片机制片；⑥醋酸、硝酸铅双重染色；⑦Hitachi H600 透射电镜观察。结果透射电镜观察：治疗前组血管基膜断裂不完整，内皮细胞固缩，胞浆内细胞器结构欠清晰（见图 1）；黏膜下胶原纤维致密，相对较粗，部分成纤维细胞固缩呈凋亡改变（见图 2）；上皮细胞间连接略松散，桥粒结构尚清晰，胞浆内大多线粒体嵴丢失，呈空泡变（见图 3）；实验组治疗后血管基膜完整，内皮细胞及周围细胞内细胞器结构清晰，核膜完整，染色清，分布较均匀（见图 4）；黏膜下胶原纤维较疏松，有炎性细胞浸润，成纤维细胞结构正常（见图 5）；上皮细胞间连接稍松散，桥粒结构清晰，胞浆内少量的线粒体嵴丢失，呈空泡变（见图 6）。图 1 OSF 治疗前血管基膜断裂、见突起，内皮细胞固缩，胞浆细胞器结构欠清晰（× 6000）刘丽芳 1，彭解英 2＊，徐锡萍 3

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