司),PGE2放免分析药盒(购于威佳公司),SOD
测定试剂盒(购于南京建成生物工程研究所).
2 含药血清的制备 将药物按体表面积折算动
物的等效剂量,根据预实验结果给予动物10倍剂
量,用生理盐水配成15m l 次溶液灌胃,正常兔
血清以生理盐水15m l 次灌胃.连续2次灌胃,
42Ch ine seJT radM edT raum&O rthop,J une2005,V o l. 13,N o. 3
中间间隔4h,于末次灌胃1h后戊巴比妥钠腹腔
麻醉下腹主动脉采血, 4℃冰箱过夜,离心(2500
rpm)25m in,抽取血清, 56℃,30m in灭活,经0.
22Lm滤膜抽滤除菌,分装,220℃保存备用.
3 观察指标 采用兔软骨细胞培养方法 1 获得
传一代软骨细胞,用DM EM培养液(含10%胎牛
血清)稀释成2×105 m l, 24孔培养板中每孔1
m l,培养24h细胞贴壁后,吸去上清液分别更换
为含空白兔血清,活骨胶囊及西乐葆的DM EM
培养液,除空白兔血清组外其它各组各孔中同时
分别加入100U m lIL- 1B培养5天后收集各孔
上清液,根据SOD,PGE2试剂盒上说明书方法于
可见光分光光度计上检测各孔消光值换算出
SOD和PGE2大小.
4 统计分析 采用SPSS11. 0进行组间比较.
结果
倒置显微镜下观察见各组软骨细胞呈圆形,
鹅卵石样外观,符合关节软骨细胞早期培养特点;
甲苯胺蓝染色见兔血清对照组异染程度明显下
降.各组SOD和PGE2测定结果见表1,表2.
表1 含药血清对培养软骨细胞SOD的影响
(x
q±s) (NU m l)
组别样本数SOD
空白兔血清组616. 17±1. 3433
兔血清对照组65. 19±2. 72
活骨胶囊组615. 75±2. 0133
西乐葆组614. 31±1. 4433
注:各组与兔血清对照组相比,33P< 0. 01
表2 含药血清对培养软骨细胞PGE2的影响
(x
q±s) (p g m l)
组别样本数PGE2
空白兔血清组687. 35±9. 84

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