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目录
实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十 实验十一 实验十二 环境中微生物的检查 普通光学显微镜的使用 细菌运动性的观察 细菌的形态结构观察——简单染色,革兰氏染色 细菌的荚膜染色和芽孢染色 放线菌的形态结构观察 霉菌的形态结构观察 微生物细胞大小的测定 显微镜下直接测数法--血球计数板法 理化因素对微生物的影响 培养基的制备 土壤微生物的分离与测数
一.实验目
1.了解环境中微生物的存在. 2.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型. 3.观察不同类型微生物的菌落形态特征. 4.体会无菌操作的重要性,初步建立微生物工作者必须具 有的"无菌"概念.
二.实验原
微生物种类繁多且无处不在
t 细菌数亿/g土壤,土壤中的细菌总重量估计为:1.0034 × 10 16 吨; t 每张纸币带细菌:900万个; t 人体体表及体内存在大量的微生物: 皮肤表面:平均10万个细菌/平方厘米; 口腔:细菌种类超过500种; 肠道:微生物总量达100万亿, 粪便干重的1/3是细菌,每克粪便的细菌总数为:1000亿个; t 每个喷嚏的飞沫含4500-150000个细菌,重感冒患者为8500万.
但微生物个体很小,肉眼不可见
球菌
0.5～1μm 0.5～1μm × 1～ 8μm 0.3～1μm ×1～ 50μm
杆菌
螺旋菌
若用营养琼脂平板法进行检测,可以看到其群体结 构. 平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自 不同来源的样品接种于培养基上,在适宜温度下培养,1～ 2 d内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成 一个可见的细胞群体的集落,称为菌落. 每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌 落的大小,表面干燥或湿润,隆起或扁平,粗糙或光滑, 边缘整齐或不整齐,菌落透明,半透明或不透明,颜色以 及质地疏松或紧密等.因此,可通过平板培养来检查环境 中细菌的数量和类型.
三.实验器
1.培养基 肉膏蛋白胨琼脂平板 2.仪器或其他用具 记号笔
四.实验步
1.编号 任何一个实验,在动手操作前均需首先将器皿用记 号笔做上记号,写上班级,姓名,日期,本次实验还要 注明处理号,写在皿底的一边,不要写在当中,以免影 响观察结果. 培养皿的记号一般写在皿底上,如果写在皿盖上, 同时观察两个以上培养皿的结果,打开皿盖时,容易混 淆.
2.环境中微生物的检查 (1)空气 将一个肉膏蛋白胨平板放在桌面上,移去皿 盖,使其暴露在空气中5~10min后盖上皿盖. (2)手指 移去皿盖,用手指在琼脂平板的表面轻轻地来 回划线,盖上皿盖. (3)头发 取头发一根,在平板表面任一方向划线3~5 条,盖上皿盖. (4)咳嗽 将揭开皿盖的琼脂平板放在离口约6～8 cm 处,对着琼脂表面用力咳嗽,然后盖上皿盖. 3.将所有的琼脂平板翻转 使皿底朝上,放28℃培养箱,培养2～3 d.
五.实验报
(1) 菌落计数 在划线的平板上,如果菌落很多而重 叠,则数平板最后1/4面积内的菌落数.不是划线的平 板,也一分为四,数1/4面积的菌落数. (2) 根据菌落大小,形态,高度,干湿等特征观察 不同的菌落特征.但要注意,如果细菌数量太多,会 使很多菌落生长在一起,或者限制了菌落生长而变得 很小,因而外观不典型,故观察菌落的特点时,要选 择分离的很开的单个菌落.
将你自己的平板结果记录于下表中.
皿号 菌落数 (近似值) 特 征 描 写 形状 大小 色泽 光泽 高度 透明度 表面 边缘
1 2 3 4 CK
菌落特征描写方法如下: ① 形状:圆状,丝状,不规则状,假根状 . ② 大小:以直径表示. ③ 表面:光滑,干燥,湿润,皱褶. ④ 光泽:玻璃状,蜡质状,油脂状. ⑤ 高度:扁平,隆起,凹下. ⑥ 透明程度:透明,半通明,不透明. ⑦ 边缘:整齐,不整齐.
1. 比较各种来源的样品,哪一种样品的平板菌落数与菌 落类型最多 2. 通过本次实验,在防止培养物的污染和防止细菌的扩 散方面,你学到些什么 有什么体会
一.实验目
1.学习并掌握油镜的原理和使用方法. 2.学习普通台式显微镜的结构,各部分的功能和使用方 法.
二.实验原
1676年,微生物学的先驱荷兰人列文虎克(Antony van leeuwenhoek)首次观察到了细菌.

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