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3期
王
虹等:光质对黄瓜叶片衰老与抗氧化酶系统的影响
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AAATC-3′. 用 Qiagen 公司的 RNA 纯化试剂盒进行纯化, 用 Fermentas 公司的反转录试剂盒合成 cDNA 的第 一条链,以此作为 qRT-PCR 的模板.qRT-PCR 的 体系(20 L):10 L iQ SYBR Green Supermix, 1 L 稀释的 cDNA,0.1 molL 的上下游引物. qRT-PCR 在 Bio-Rad 公司的 iQ Multicolor 实时定 量 PCR 检测系统中进行. 95℃ 3 min 预变性, PCR 循环:95℃ 变性 10 s,58℃ 退火 45 s,共 40 个 循 环 , 在 58℃ 这 一 步 采 集 荧 光 . 以 黄 瓜 看 家 基 因 actin 的荧 光 值作 为计 算 时的 内标 , 相对 基因 表 达 水 平 的 计 算 参 照 Livak 和 Schmittgen 的 2 -CT 法 [20] . 1.3.4 数据处理 采用 ANOVA (analysis of variance) 软件进行相关数据的统计分析.
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结果
丙二醛含量的动态变化 由图 2 所示, 不同光质处理后黄瓜叶片的叶绿素,
2.1 不同光质处理黄瓜叶片中叶绿素, 可溶性蛋白及
可溶性蛋白及丙二醛的含量发生明显的变化.与对照 白光相比,绿光和黄光处理的植株的叶绿素含量均呈 现明显的下降.在整个试验过程中,紫光,蓝光和红 光处理的植株的叶绿素含量高于白光处理的植株(图 2-A).可溶性蛋白在处理的过程中呈现下降的趋势, 处理结束后可溶性蛋白的含量依次为:蓝光>紫光> 白光>红光>绿光>黄光(图 2-B).丙二醛(MDA) 是膜脂过氧化产物之一,是反映细胞膜伤害程度的重 要指标. 随着处理时间的延长, 叶片的 MDA 含量持续上 升,且黄光>红光>绿光>白光>紫光>蓝光(图 2-C).
W:白光;P:紫光;B:蓝光;G:绿光;Y:黄光;R:红光.下同 W: White light;P: Purple light;B: Blue light;G: Green light;Y: Yellow light;R: Red light. The same as below
图2 Fig. 2
不同光质处理对黄瓜叶片叶绿素,可溶性蛋白及丙二醛含量的影响
Effects of different light qualities on the contents of chlorophyll, soluble protein and MDA in cucumber leaves
2.2 不同光质处理对黄瓜叶片中抗氧化酶活性影响 作为植物体内的活性氧清除酶系统的重要保护酶 CAT,APX,G-POD,SOD 活性的增加可以有效阻止 活性氧的积累,防止膜脂过氧化的产生,从而延缓植 株的衰老进程.由图 3 所示,白光,紫光,蓝光处理 的植株叶片的 CAT 活性先上升, 处理 10 d 后再下降. 而绿光,黄光,红光处理的植株叶片的 CAT 活性均呈 下降趋势.到处理的第 15 天时,与对照的白光相比, 紫光和蓝光的处理分别提高了 6.9%和 12.9%, 而绿光, 黄光,红光的处理分别降至白光的 66.3%,66.0%和 72.5%.不同光质处理后,APX,G-POD,SOD 的活 性在整个处理期间的变化趋势类似.以 G-POD 为例,
与对照白光相比,在整个处理期间,紫光和蓝光处理 的植株的 G-POD 活性较高,而绿光,黄光和红光均 降低了该酶的活性.处理结束后,紫光,蓝光,绿光, 黄光,红光下的 G-POD 活性分别为白光的 128.9%, 96.4%,60.0%,69.6%和 80.3%. 2.3 不同光质处理对黄瓜叶片抗氧化酶基因表达的 影响 为了从基因表达水平上研究不同光质对抗氧化酶 的调控机理, 采用 qRT-PCR 的方法对活性氧代谢中的 重要保护酶 CAT,cAPX,POD,SOD 的基因表达进 行了分析.图 4 的数据表明,紫光和蓝光均促进了 这 4 个基因的表达.其中,蓝光处理 3 d 后,CAT,
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中 国
农
业
科
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Fig. 3
图 3 不同光质处理对黄瓜叶片中 CAT,APX,SOD 和 G-POD 活性的影响 Effects of different light qualities on the activities of CAT, APX, SOD and G-POD in cucumber leaves

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